Mikroskops izskatās dzīvo zivju šūnās

Jaunā metode ļauj filmēt pat mikro mērogā

Zaļā fluorescences gaismā šūnu struktūras, šeit mikrotubulas, var novērot dzīvu zivju embrijus. © NIH, KIT
lasīt skaļi

Pētnieki ir izstrādājuši jaunu metodi, kas ļauj dzīvās zivju kāpuros vizualizēt pat sīkas šūnu struktūras, kas ir vienas astotdaļas mikrona lieluma. Jaunā mikroskopa metode parāda ne tikai detaļas un dažādus dziļuma līmeņus audos. Tas pat var radīt filmas.

Mikroskopi sniedz vērtīgu ieskatu šūnu struktūrā un dinamikā. It īpaši, ja viņi var palikt dabiskajā vidē. Tas ir ļoti grūti, īpaši ar augstākiem organismiem. "Zebrzivs ir ļoti labi piemērots ģenētiskiem pētījumiem par šūnām, jo ​​tā kāpuri ir pilnīgi caurspīdīgi, " skaidro Marina Mione no Karlsrūes Tehnoloģiju institūta (KIT). Lai noteiktas struktūras būtu pamanāmas, tās ir fluorescējoši krāsotas, galvenokārt ar gēnu inženierijas metodēm.

Pašreizējā pētījumā pētnieks kopā ar kolēģiem no Maksa Planka Polimēru pētniecības institūta Maincā un Nacionālajiem veselības institūtiem (NIH) tagad novēroja

Izmantojot jaunu metodi, zivju šūnu skeleta daļas, tā sauktās mikrotubulas, izmanto jaunu mikroskopijas paņēmienu. Vītnei līdzīgu mikrotubulu garums ir apmēram 100 mikroni un diametrs ir aptuveni 20 nanometri, tātad matu simtdaļās. "Mikrotubulas ir atrodamas visā šūnā un ir vajadzīgas to dalīšanai un pārvietošanai."

Gaismas punkts rāda sīkas detaļas

Jaunajai mikroskopa metodei objekts nav pilnībā apgaismots, bet tikai punkcionāli veidots ar īpašu gaismu. Rezultātā izkliedētā gaisma tiek samazināta līdz minimumam, un krasi tiek parādīta viena apgaismotā detaļa. Attēlu sērija ar atšķirīgu apgaismojumu beidzot tiek salikta no datora uz pilnīgu attēlu. Izmantojot izveicīgu apgaismojumu, ir pat iespējams pielāgot lauka dziļumu, fotografēt dažādus dziļuma līmeņus un savienot tos ar trīsdimensiju attēlu datorā. "Pa to laiku var tikt realizēta izšķirtspēja - 145 nanometri plaknē un 400 nanometri starp tām, " saka Mione. displejs

Filmu kadri mikromērogā

Ieraksti tiek veikti dažu sekunžu laikā, lai šūnu kustība neizraisītu izplūšanu. "Drīzāk mikrotubulu kustības video var izveidot, izmantojot attēlu sēriju." Eksperimentā pētnieki 60 minūšu laikā varēja novērot, kā sānu līnijas orgāna agrīnā stadija veido apmēram 45 mikronus zem zivju ādas. Ūdenī esošās zivis var uztvert kustības stimulus. Šādi ieraksti par dzīvo organismu sniedz vērtīgu ieskatu mugurkaulnieku attīstībā šūnu līmenī. (Nature Methods, 2012; doi: 10.1038 / nmeth.2025)

(Karlsrūes Tehnoloģiju institūts, 16.05.2012. - NPO)